1.3方法

1.3.1溶液配製和乳液製備

采用Tris-HCl緩衝液（10 mmol/L，pH 7.0）配製一定質量分數的GA溶液、WPI溶液和T80溶液，調節pH 7.0，室溫條件下滾軸混合過夜，使其溶脹完全。在上述溶液中加入MCT，高速剪切乳化機預乳化3 min（26 000 r/min），采用高壓納米均質機均質，75 MPa一次循環，得到水包油型乳液，整個實驗過程在冰水浴條件下完成。

1.3.2乳液粒徑測定

使用Mastersizer 2000型激光粒度儀分別測定不同質量分數的GA乳液、WPI乳液和T80乳液的粒徑。為防止多重散射，需要逐滴加入乳液至折光度略高於10%，並在實驗過程中持續攪拌。為與配製乳液的溶劑保持一致，在測量乳液粒徑時使用超純水作分散劑。GA-MCT的折光率為1.47，WPI-MCT的折光率為1.54，T80-MCT的折光率為1.08。

1.3.3複合乳液的製備

對於GA-T80乳液體係，在GA溶液中加入MCT，高速剪切乳化3 min（26 000 r/min），采用高壓納米均質機均質，75 MPa一次循環，得到水包油型乳液，整個實驗過程在冰水浴條件下完成。在新製得的乳液中加入T80溶液，磁力攪拌至少3 h，得到終質量分數為10%GA、0.2%T80和20%MCT的複合乳液。采用T80先乳化均質再添加GA吸附可得到T80-GA乳液體係。將GA和T80溶液混合，加入MCT乳化均質，得到GA＋T80乳液體係。3種製備方法條件下乳液終質量分數均為10%GA、0.2%T80和20%MCT。WPI/T80複合乳液體係製備方法參照GA/T80複合乳液體係。

1.3.4消化動力學測定

取1 mL乳液用Tris-HCl（10 mmol/L，pH 7.0）緩衝液稀釋40倍，取30 mL，調節pH 7.0，在37℃條件下水浴振蕩30 min。隨後加入NaCl、CaCl2、膽鹽、脂肪酶，終體積為37.5 mL，得到終濃度為150 mmol/L NaCl、20 mmol/L CaCl2、5 mg/mL膽鹽、胰脂肪酶1.6 mg/mL的體外模擬小腸環境[17]。最後用pH-stat全自動電位滴定儀在恒定pH 7.0條件下測定消化動力學曲線。通過消耗的NaOH量可計算得到乳液體係中遊離脂肪酸（free fatty acids，FFA）的釋放率，從而可評價小腸中脂肪消化的程度。FFA釋放率按公式（1）計算：

式中：V（NaOH）為消耗NaOH的體積/mL；m（NaOH）為NaOH濃度/（mol/L）；wLipid為消化反應中最初的油脂的質量（194 mg）；MLipid為中鏈甘油酸酯的摩爾質量（500 g/mol）。

1.3.5界麵張力和模量測定

用界麵流變儀測量各乳化劑在油-水界麵吸附時引起的界麵張力和界麵彈性模量的變化。采用帶有U型針頭的微量注射器（內徑0.56 mm），全自動泵控製油滴體積。測定界麵張力時，采用恒定油滴表麵積14.0 mm2。測定界麵彈性模量時，采用周期控製油滴表麵積（14.0±1.4）mm2（即振幅10%），振蕩周期為0.05～0.1 Hz的模式。整個實驗在37℃水浴條件下控溫進行。

通過CCD相機高速采集油滴輪廓信息，通過Laplace方程計算得到界麵張力，通過監測油滴表麵積發生變化時界麵張力的變化值，計算得到界麵彈性模量，按公式（2）、（3）計算：

式中：π界麵壓/（mN/m）；γ0是純油-水界麵的張力值/（mN/m）；γ為溶液界麵張力的變化/（mN/m）；A為界麵麵積/mm2；ε為界麵彈性模量/（mN/m）。

1.3.6界麵分步吸附

乳化劑和膽鹽在界麵上分步吸附引起的界麵張力和界麵彈性模量變化的測定方法按1.3.5節。對於GA-T80體係，向樣品池中加入10 mL含有10 mmol/L Tris-HCl緩衝液（pH 7.0）、150 mmol/L NaCl、20 mmol/L CaCl2的GA溶液，280 r/min持續攪拌。待GA在油-水界麵上吸附平衡後，在12 000 s時加入含有相同水相的T80溶液，待其吸附平衡後，在24 000 s時加入膽鹽（終質量濃度0.125 mg/mL），待其吸附平衡。對於T80-GA體係，先加入T80溶液吸附平衡，在12 000 s處再加入含相同水相的GA溶液，待吸附平衡後在24 000 s時加入終質量濃度為0.125 mg/mL的膽鹽。對於GA＋T80體係，將GA和T80混合溶液加入樣品池使其吸附平衡，在24 000 s處加入相同質量濃度的膽鹽，待其吸附平衡。WPI和T80複合體係的界麵分步吸附操作參照GA和T80複合體係。

1.4數據處理

各實驗均重複3次以上，結果以±s表示。